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获取目的基因的步骤

答案:2  悬赏:70  手机版
解决时间 2021-02-24 11:27
  • 提问者网友:心如荒岛囚我终老
  • 2021-02-23 14:59
获取目的基因的步骤
最佳答案
  • 五星知识达人网友:十年萤火照君眠
  • 2021-02-23 15:26
设计引物用PCR扩增出来 内切酶的选择是根据载体和目的基因的序列 切完跑胶回收后用T4连接酶连接 再转化、涂板、菌P、摇菌、提质粒,就可以得到稳定表达目的基因的载体了
全部回答
  • 1楼网友:千杯敬自由
  • 2021-02-23 16:01
目的基因片段的获取:目的基因的组成:一个能转录翻译的结构基因应包括转录启动区、核糖体识别区、编码区、和转录终止区。 获得途径:1限制性内切酶酶切法2利用pcr技术直接扩增目的基因3目的基因的化学合成4通过构建基因组文库或cdna文库分离目的基因5反向转录法分离目的基因 目的基因导入受体细胞:原核生物最理想受体细胞:大肠杆菌、枯草杆菌、蓝藻、棒状杆菌。真核生物应用最广的受体细胞:酵母细胞 途径:1电穿孔法2基因枪法3激光微束穿孔法4显微注射法5多聚物介导法6脂质体介导转化法 克隆子的筛选鉴定:克隆子的筛选方法:1根据载体选择标记基因2根据报告基因 3根据pcr扩增片段4根据限制性核酸内切酶图谱分析5采用dna杂交法6应用dna芯片7dna核苷酸序列测定
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