几个标本之间做RT-PCR为什么要把RN的浓度调成一致
答案:1 悬赏:80 手机版
解决时间 2021-11-27 10:56
- 提问者网友：龅牙恐龙妹
- 2021-11-26 22:19
几个标本之间做RT-PCR为什么要把RN的浓度调成一致
最佳答案
- 五星知识达人网友：不如潦草
- 2021-11-26 23:29
在做QRT-PCR时，一定要有内参，即在PCR时，每个标本都要做对应的内参，而且每次都是看家基因，一般用bate-actin，有时也用GAPDH。
内参的选择：普通PCR内参的大小没有多大要求，但real time一般选择300bp以下。
它的作用在于你提取的RNA逆转录成cDNA时，加入的浓度可能会不一致，即使用分光广度计测其浓度，也会有仪器误差，跑出的条带要进行灰度分析。用目的基因的积分光密度比上内参的光密度就是你这个基因实际表达的量。
希望对你有所帮助。
内参的选择：普通PCR内参的大小没有多大要求，但real time一般选择300bp以下。
它的作用在于你提取的RNA逆转录成cDNA时，加入的浓度可能会不一致，即使用分光广度计测其浓度，也会有仪器误差，跑出的条带要进行灰度分析。用目的基因的积分光密度比上内参的光密度就是你这个基因实际表达的量。
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