（14分）大豆是两性花植物。下面是大豆某些性状的遗传实验：（1）大豆子叶颜色(BB表现深绿；Bb表现浅绿；bb呈黄色，幼苗阶段死亡)和花叶病的抗性(由R、r基因控制)遗传的实验结果

（14分）大豆是两性花植物。下面是大豆某些性状的遗传实验：
（1）大豆子叶颜色(BB表现深绿；Bb表现浅绿；bb呈黄色，幼苗阶段死亡)和花叶病的抗性(由R、r基因控制)遗传的实验结果如下表：
组合
母本
父本
F1的表现型及植株数
一
子叶深绿不抗病
子叶浅绿抗病
子叶深绿抗病220株；子叶浅绿抗病217株
二
子叶深绿不抗病
子叶浅绿抗病
子叶深绿抗病110株；子叶深绿不抗病109株；
子叶浅绿抗病108株；子叶浅绿不抗病113株

①组合一中父本的基因型是 ，组合二中父本的基因型是 。
②用表中F1的子叶浅绿抗病植株自交，在F2的成熟植株中，表现型的种类有 种，其比例为 。
③用子叶深绿与子叶浅绿植株杂交得F1，F1随机交配得到的F2成熟群体中，BB基因型频率为 ，b基因频率为 。
④要求在最短的时间内选育出纯合的子叶深绿抗病大豆材料：用组合 （填组合一或二，父本或母本）本植株 ，在子代中选出子叶深绿类型即为纯合的子叶深绿抗病大豆材料。有人试图利用细菌的抗病毒基因对不抗病大豆进行遗传改良，以获得抗病大豆品种。
①构建含外源抗病毒基因的重组DNA分子时，使用的工具有 。
②判断转基因大豆遗传改良成功的标准是 ，本题中具体的检测方法 是
③基因工程中，需要使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。现已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。根据图示判断质粒用 切割，目的基因用 切割，此时作标记基因的是基因 。
①BbRR;BbRr ②4；3：1；6：2 ③60%；20% ④一的父 自交

(答案→)①BbRR;BbRr ②4；3：1；6：2 ③60%；20% ④一的父 自交 解析：⑴由表中F1的表现型及其植株数可知，两对性状均呈现出固定的比例，因此，都属于细胞核遗传，且花叶病的抗性基因为显性。①组合一中的母本基因型为BBrr；由于组合二的后代中出现了不抗病的后代，因此，组合二中父本的抗病基因组成为杂合子，即组合二中父本的基因型为BbRr。②分析表中数据可知，F1中的子叶浅绿抗病植株的基因型为BbRr，其自交后代F2的成熟植株中会出现子叶深绿抗病(3/12BBR )：子叶深绿不抗病(1/12BBrr)：子叶浅绿抗病(6/12BbR )：子叶浅绿不抗病(2/12Bbrr)，其比例为3：1：6：2。③子叶深绿(BB)与子叶浅绿(Bb)植株杂交所得F1的成熟植株基因型及其比例为1/2BB、1/2Bb，让F1随机交配则所得F2的基因型及其频率为9/16BB、6/16Bb、1/16bb，但bb植株不能成熟，因此，成熟植株中B的基因频率为(9/16+3/16)/(15/16)=4/5，即80%。④要想通过单倍体细胞的原生质体融合获得子叶深绿植株，则原生质体均必需含有B基因，若要获得抗病植株则至少有一个原生质体含有R基因，因此，可以有BR与BR、BR与Br两种组合。⑤由上面的分析可知，组合一中父本基因型为BbRR，让其自交得到子代，子代中深绿个体即为所需，此种方法只需一年即可得到。值得注意的是：尽管单倍体育种的方法也能在一年内获得子叶深绿抗病的纯合植株，但操作较为复杂，且题中具有RR的个体，而子叶深绿可通过性状表现直接选择，因此不宜选择单倍体育种方法获得。⑵①基因工程中的工具酶包括限制性内切酶和DNA连接酶两种；②确定改良是否成功的依据是看性状是否正确表达，即培育的植株是否具有病毒抗性，检测方法为用病毒分别感染转基因大豆植株和不抗病植株，观察比较植株的抗病性。质粒用限制酶I切割，可以保证只有一个切口，若用限制酶II切割的话，则会有两个切点，质粒就会被切为两段了。而目的基因两端的特殊序列不同，用限制酶II切割刚好。

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